【摘 要】
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本文建立了稳定的胎儿间充质干细胞(FMSCs)体外培养扩增体系,探索其在体外诱导为肝细胞样细胞的分化潜能.方法:通过密度梯度离心、贴壁筛选法分离培养人FMSCs,应用流式细胞术
【机 构】
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第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心,710038
【出 处】
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第三届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议
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本文建立了稳定的胎儿间充质干细胞(FMSCs)体外培养扩增体系,探索其在体外诱导为肝细胞样细胞的分化潜能.方法:通过密度梯度离心、贴壁筛选法分离培养人FMSCs,应用流式细胞术检测其特异表面标志物的表达.加HGF、FGF-4诱导其向肝细胞分化,检测AFP、CK18、白蛋白等肝细胞特异表面标志物的表达,在不同时间点(第4、8、12、16d)分析细胞合成糖原能力,留取培养上清测定白蛋白及尿素含量的变化.结果:FMSCsCD14/CD34/CD45阴性,CD29/CD44阳性,核浆比大,具有原始细胞的特征.加以HGF、FGF-4诱导后,细胞形态改变,细胞表达低水平AFP,CK18、白蛋白染色阳性.随细胞培养时间的延长,诱导培养的各组细胞,糖原含量逐渐升高,不加诱导的FMSC未见糖原阳性染色.各时间点培养上清中尿素及白蛋白的含量随诱导时间的推移而增加.结论:FMSCs在体外的分离与培养都较为简单,其增殖能力比较旺盛,可经15次传代而保持未分化状态,在HGF和FGF-4的诱导下,FMSC向肝细胞分化,表达肝细胞特异的表面标志物,诱导后FMSC可产生糖原与尿素,提示该细胞已经具备肝细胞的部分功能性特征,有可能作为肝病细胞治疗的理想细胞.
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