微孔化异种真皮支架提供骨髓间充质干细胞传输平台修复部分皮肤附件在体研究

来源 :第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sleepyxu
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  目的 介绍一个细胞传递平台,利用微7L化异种真皮矩阵结构支架作为骨髓间充质干细胞体外预处理平台,联合动物皮肤缺失创面在体移植,修复重建皮肤部分附件结构,借此评价这种平台的有效性和诱导干细胞分化修复皮肤附件模型的可靠性.方法 在本实验所设计的微7L化真皮基质材料(LPADM)的表皮面接种骨髓间充质干细胞,体外共培养5天,构成MSCs-LPADM复合体.选取健康雄性裸鼠21只,麻醉后在其背部正中做-2×2cm2的全层皮肤缺损创面,达深筋膜.实验设计采用“【真皮支架】+覆盖物”表达形式,分为以下四组:MSCs-LPADM+PADM组(A组)、LPADM+刃厚皮片组(B组)、MSCs-PADM+刃厚皮片组(C组)、MSCs-LPADM+刃厚皮片组(D组).分别于术后第7、14天取材,进行HE染色、透射电镜观察两种人工真皮支架(MSCs-LPADM/MSCs-PADM)在体诱导骨髓间充质干细胞向皮肤附件分化的现象.结果 C组移植大体观皮片干燥,无血运未能存活,不符合临床实际需要,直接排除,该组不再进行组织学检查.其余A\B\D三组于术后第7天,活体取材行HE染色可见大量成纤维细胞迁入真皮支架,含有红细胞的功能性血管丰富,透射电镜下三组粗面内质网丰富,A、B、D三组无明显差别.术后14天,透射电镜显示D组见新生的无髓神经样细胞,在LPADM的浅层,可见新迁入的类似皮脂腺样细胞和类似汗腺样细胞,但在LPADM的全层未找到毛囊细胞.A组、B组的真皮基质交接处所形成的毛细血管较D组明显较少、也未发现新生神经、类皮脂腺样细胞及类汗腺样新生皮肤附件结构.结论 构建微7L化、网络化的7L径、空间隙的LPADM,能满足骨髓间充质干细胞的迁入、增殖、分化细胞生物活性正常表达;能为在体实现部分皮肤附件和定向再生提供类生理样在体微环境.该项研究的方法 ,可为模拟骨髓间充质干细胞微环境、定向皮肤附件再生模型的深化复合皮的研究提供新的细胞研究平台.
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