【摘 要】
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DNA和蛋白质都是与生命活动息息相关的生物大分子，两者的相互作用是DNA翻译、复制、重组以及修复等过程中极其重要的一环.研究DNA以及DNA-蛋白质复合物的组成结构和相互作用，对理解基因表达调控以及疾病的发病机制等生命现象很有帮助.毛细管电泳技术(CE)因其具有高效、快速、灵敏度高以及易于自动化等优点而得到了分析研究者们的广泛关注.CE在DNA、蛋白质分离测定以及DNA与蛋白质相互作用1等研究领域
【机 构】
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中国科学院大学化学与化工学院,北京100049 中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家
【出 处】
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中国化学会第十八届全国有机分析及生物分析学术研讨会
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DNA和蛋白质都是与生命活动息息相关的生物大分子，两者的相互作用是DNA翻译、复制、重组以及修复等过程中极其重要的一环.研究DNA以及DNA-蛋白质复合物的组成结构和相互作用，对理解基因表达调控以及疾病的发病机制等生命现象很有帮助.毛细管电泳技术(CE)因其具有高效、快速、灵敏度高以及易于自动化等优点而得到了分析研究者们的广泛关注.CE在DNA、蛋白质分离测定以及DNA与蛋白质相互作用1等研究领域中发挥了重要作用.我们2将LIF-CE技术应用于DNA-蛋白质复合物的分析，极大地提高了对DNA-蛋白质复合物检测的分析和解析能力.本研究基于DNA-蛋白质复合物与游离的DNA分子在一定的外加电场中有着不同的电泳迁移率，采用激光诱导荧光毛细管电泳(LIF-CE)探究一定长度DNA-MBD蛋白质复合物在中性毛细管中的自由溶液电泳迁移行为，从而研究DNA-蛋白质复合物的相关性质.由于甲基化结合蛋白(MBD蛋白)是一种碱性蛋白质，很容易被吸附到带负电的毛细管内壁上，影响实验结果.为此，我们采用聚丙烯酰胺涂层中性毛细管来解决蛋白质的吸附问题，前期的实验结果表明，各DNA-蛋白质复合物与游离的DNA能够很好的分离(图1)，这为我们进一步探究一定链长DNA-蛋白质复合物的电泳迁移规律打下了基础.
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