【摘 要】
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目的：研究T IMP-1 siRNA、TIMP-2siRNA对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝星状细胞的凋亡作用及Smad蛋白表达的影响.方法：采用前期构建的TIMP-1 siRNA、TIMP-2siRNA治疗前后肝纤维
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院感染科 400010
【出 处】
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第二十三次全国中西医结合肝病学术会议
论文部分内容阅读
目的：研究T IMP-1 siRNA、TIMP-2siRNA对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝星状细胞的凋亡作用及Smad蛋白表达的影响.方法：采用前期构建的TIMP-1 siRNA、TIMP-2siRNA治疗前后肝纤维化大鼠的肝脏组织作为研究对象，分为正常组、模型组、TIMP-1 siRNA 0.25mg/kg组、TIMP-2siRPNA 0.25 mg/kg组和阴性对照组(0.25mg/kg非特异性靶序列).正置荧光显微镜计数免疫荧光双标Tunel阳性细胞和α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞.免疫组织化学和Western blot检测Smad2、Smad3、Smad4的蛋白表达；Real-time PCR法检测Smad2、Smad3、Smad4、MMP9的mRNA表达.结果：正置荧光显微镜计数结果显示TIMP-1 siRNA 0.25mg/kg组、TIMP-2siRNA 0.25 mg/kg组免疫荧光双标Tunel阳性细胞和α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞较模型组、阴性对照组增加(P＜0.05).免疫组织化学及Western blot结果显示TIMP-1 siRNA 0.25mg/kg组、TIMP-2 siRNA 0.25 mg/kg组smad2、smad3、smad4的蛋白表达量较模型组、阴性对照组明显减少(P＜0.05).Real-time PCR结果显示TIMP-1 siRNA0.25mg/kg组、TIMP-2siRNA 0.25 mg/kg组smad2、smad3、smad4的mRNA表达量较模型组、阴性对照组明显减少(P＜0.05)；TIMP-1 siRNA 0.25mg/kg组、TIMP-2siRNA 0.25 mg/kg组MMP9的mRNA表达量较模型组、阴性对照组明显增加.(P＜0.05)结论：TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA促进了活化的肝星状细胞的凋亡，对Smad蛋白的表达量有明显的抑制作用.
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