【摘 要】
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目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)转染骨髓源性血管内皮祖细胞(EPC)的体外基础研究,进而探讨用于缺血性疾病基因治疗的可行性。方法:体外获取大鼠骨髓,分离单个核细胞,经培养
【出 处】
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第三届“全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会”第二届“血管外科与组织工程专题研讨会”
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目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)转染骨髓源性血管内皮祖细胞(EPC)的体外基础研究,进而探讨用于缺血性疾病基因治疗的可行性。方法:体外获取大鼠骨髓,分离单个核细胞,经培养,鉴定为EPC。用脂质体介导pcDNA3.0-hVEGF165转染,转染后ELISA法检测培养上清中VEGF蛋白水平,培养上清与ECV304细胞共培养以评价VEGF蛋白的活性,MTT法评价转染EPC后对细胞活性的影响,免疫细胞化学检测EPC表达VEGF、vWF、VEGF-R2的变化。结果:脂质体介导pcDNA3.0-hVEGF转染EPC能表达较高浓度的VEGF蛋白水平,转染后对EPC的增殖无影响,表达VEGF、vWF、VEGF-R2的比率随时问而逐渐升高。结论:脂质体介导pcDNA3.0-hVEGF0165转染EPC后能表达一定浓度有功能的VEGF蛋白,能帮助EPC保持内皮细胞的特性,帮助EPC向成熟内皮细胞分化,可应用于体内治疗缺血性疾病。
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