【摘 要】
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目的：为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。 方法：采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,国家动物海绵状脑病实验室,北京 100193
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会
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目的：为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。
方法：采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70 mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。
结果：电镜下可以观察到提取的exsomes平均大小为50～100nm。免疫印迹法分析结果显示,提取的exosomes表达Flotillin、Tsg101和Hsp70蛋白,相对分子质量(Mr)分别为45 000、43 000和70 000,但不表达calnexin蛋白;免疫电镜分析显示exsomes膜表面和内部有明显的金颗粒。
结论：Ana-1巨噬细胞分泌exsomes。
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