益生菌通过肠神经胶质细胞调节肠道功能的机制研究

• 作 者: 张奕昕;
• 机 构: 250012 济南,山东大学齐鲁医院消化内科
• 出 处: The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
• 发表日期: 2014年期

　　目的 最近有文献表明肠神经胶质细胞(EGC)对益生菌和致病菌有差异性识别功能,提示EGC可能参与肠道菌群调节肠道功能的机制之中.然而肠道菌群通过EGC起作用的机制尚不明确.本课题组一项前期工作证实,IBS患者存在EGC结构和功能异常.与正常对照者相比,IBS患者EGC内细胞核异染色质含量少,而细胞器含量较多,提示IBS患者EGC转录与翻译功能活跃.免疫荧光法发现IBS患者EGC内P物质(SP)和TNF-α含量高于对照.IBS患者结肠黏膜EGC和肠神经纤维平行增多,分布紧密,提示EGC释放的兴奋性介质密切调控肠神经纤维功能.本研究旨在探讨益生菌能否通过改变EGC的结构和功能从而调节肠道功能,改善IBS患者的症状.方法 通过PCR方法研究细菌作用于EGC后目的 基因表达的变化：取培养16h进入平台期的保加利亚乳酸杆菌,按1∶10(细菌∶细胞)接种至T-25瓶长满的新换液EGC,共培养一段时间后,测定目的 基因S100b、SP的表达量.低浓度的S100b具有神经营养作用,EGC能自分泌和旁分泌S100b,促进神经生长和修复；高浓度的S100b具神经毒性,在体外通过NO依赖途径诱导神经元死亡.脑肠肽SP与致痛有关,能刺激肥大细胞释放组织胺,刺激胃肠平滑肌等.通过硝酸还原法研究细菌作用于EGC后NO释放量的变化：取培养16 h进入平台期的保加利亚乳酸杆菌,按1∶10(细菌：细胞)接种至T-25瓶长满的新换液EGC,共培养一段时间后,用硝酸还原酶法测试培养液中NO浓度.结果 PCR方法证明EGC细胞与保加利亚乳酸杆菌共培养6h后,细菌组S100b和SP的表达均较对照组升高,分别为1.658和1.602倍.PCR方法证明EGC与保加利亚乳酸杆菌共培养24 h后,细菌组目的 基因表达量较对照组降低,分别为0.888和0.624.硝酸还原法证明EGC与保加利亚乳酸杆菌共培养6和24 h,细菌组在6h时NO浓度明显较对照组升高,而共培养24 h后差异不明显；且细菌组和对照组培养24 h后NO浓度比培养6h后要低.结论 益生菌通过改变EGC中S100b、SP等基因表达,从而影响肠道功能,这种作用具有双向性.