【摘 要】
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试验选用32～35日龄的保育猪,颈动脉放血处死,分离腺垂体,剪碎,用含0.2酶的DMEM培养液于37℃水浴孵育消化,150目细胞筛过滤,配制成密度为1×104个/mL的细胞悬液,接种.取牢固贴
【机 构】
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华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会养猪分会2006年学术年会暨第四次全国会员代表大会
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试验选用32～35日龄的保育猪,颈动脉放血处死,分离腺垂体,剪碎,用含0.2酶的DMEM培养液于37℃水浴孵育消化,150目细胞筛过滤,配制成密度为1×104个/mL的细胞悬液,接种.取牢固贴壁并开始伸展的腺垂体细胞(培养后约48 h)40孔,分成五组,每组八个重复.用五种含不同Cu2+浓度(0 mg/L、0.025 mg/L、0.1 mg/L、0.4 mg/L、1.6 mg/L)的无小牛血清DMEM培养液250 μL培养.于换液培养后的12 h、24 h、36 h观察细胞的生长情况,并吸取120 μL培养液用放射免疫分析法测定GH浓度.结果表明:(1)含0.2％胶原酶、0.05％透明质酸酶的培养液,于37℃水浴孵育消化能较好地分离腺垂体细胞,用0.1％台盼兰染色试验表明,细胞成活率在95％以上;(2)含0.025 mg/L、0.1 mg/L、0.4 mg/L Cu2+的无血清培养液培养24 h,培养液中GH浓度均高于0 mg/L组,其中0.4 mg/L组与0 mg/L组差异显著(P＜0.05);提示适宜浓度的Cu2+可促进离体培养的腺垂体细胞分泌GH,但过高浓度则对GH的分泌无促进作用.
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