钠钙交换体基因稳定转染及药物筛选细胞模型的建立

• 作 者: 龙雁;袁辉;王晓良;
• 机 构: 中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所先农坛街1 号,北京,100050
• 出 处: 2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周
• 发表日期: 2008年期

目的：构建三种不同亚型的CHO-NCX稳定转染细胞株，以便筛选可能的钠钙交换体(NCX)调节剂。
方法：采用脂质体法将NCX目的基因稳定导入CHO细胞中，检测稳定转染细胞株中NCX的蛋白表达和电流大小，并观察温度和NCX抑制剂KB-R7943对电流的影响。
结果：Western blot结果显示与CHO-pcDNA3.1空白细胞相比，CHO-NCX稳定转染细胞株中NCX蛋白的表达量显著升高；电生理结果提示CHO-NCX稳定转染细胞株中NCX电流远大于CHO-pcDNA3.1空白细胞；温度从22℃升高到35℃时，NCX电流显著增大；NCX抑制剂KB-R7943对INCX具有显著抑制作用。
结论：本试验成功的建立了特异性表达NCX1.1，NCX1.4，NCX1.5三种亚型的细胞模型，为脑缺血等疾病的研究提供了良好的药物筛选平台。