噬斑血吸附法(PFU-HA法)滴定天坛株痘苗病毒的方法学验证

来源 :第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonfy1028
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目的:对噬斑血吸附法检测天花疫苗病毒滴度进行方法学验证,通过优化条件解决该试验稳定性差、结果数据偏差大的缺陷。方法:通过预试验确定病毒的最佳稀释倍数、结果判定时间、滴定过程中的温度等参数,优化了实验方法。采用优化的噬斑血吸附法对痘苗病毒的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗进行滴定,对结果进行统计学分析,确定了痘苗病毒的滴度及相关实验参数。结果:确定了痘苗病毒滴定的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗的滴度分别为7.12±0.18、7.79±0.21、7.88±0.17、7.64+_0.14(LgPFU/ml), cv%分别为2.48、2.64、2.15和1.83,均小于5%:利用excel软件确定了试验内精密度、试验间精密度、不同实验人员的精密度,利用Qstat软件确定了本次滴定结果与以往滴定结果的关系。结论:通过验证优化了噬斑血吸附法检测天花疫苗病毒滴度的方法,确定了4个痘苗病毒样品的准确滴度及相关实验参数,为天花疫苗多项检定试验提供了可靠基础。
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