【摘 要】
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通过对艰难梭菌临床分离株的毒素基因、PCR-核糖体分型、耐药性及耐药相关基因检测和分析，了解中国石家庄地区艰难梭菌的流行情况，为有效防止艰难梭菌的暴发流行提供依据.方法：采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB；然后，对毒素阳性的标本通过富集芽孢培养法进行培养；最后，分离得到的艰难梭菌再通过多重PCR的方法同时检测艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB、二元毒素
【机 构】
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河北医科大学第二医院,河北石家庄 050000 河北医科大学第二医院,河北石家庄 050000;河
【出 处】
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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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通过对艰难梭菌临床分离株的毒素基因、PCR-核糖体分型、耐药性及耐药相关基因检测和分析，了解中国石家庄地区艰难梭菌的流行情况，为有效防止艰难梭菌的暴发流行提供依据.方法：采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB；然后，对毒素阳性的标本通过富集芽孢培养法进行培养；最后，分离得到的艰难梭菌再通过多重PCR的方法同时检测艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB、二元毒素基因cdtA和cdtB及16SrDNA基因.用常规PCR的方法对分离到的艰难梭菌进行PCR-核糖体分型.采用琼脂稀释法测定艰难梭菌对左氧氟沙星、万古霉素、甲硝唑、克林霉素、替加环素的最低抑菌浓度(MIC)，并通过PCR的方法检测克林霉素耐药相关基因ermB.结果：235份粪便标本采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因，共检测出37份阳性标本，阳性率为15.7％.对37份毒素基因阳性的标本用富集芽孢培养法进行艰难梭菌培养，共培养出32株菌，培养阳性率为86.5％.用多重PCR分别对分离出的32株菌进行毒素A、B(tcdA、tcdB)、二元毒素A、B(cdtA、cdtB)及16SrDNA检测.发现所有菌株的毒素A、B基因均阳性，未检出二元毒素基因.32株艰难梭菌分成12种不同的PCR核糖体型.其中S Ⅰ型最多，占28％，没有发现核糖型027和078型.所有菌株对甲硝唑、万古霉素、替加环素均高度敏感.但是对克林霉素(MIC＞128mg/l)和左氧氟沙星(MIC＞64mg/l)出现了高水平耐药，并且耐药率较高，分别为100％和87.5％.对美洛培南的耐药率较低为18.8％.32株对克林霉素耐药的艰难梭菌中，检出18株ermB基因阳性菌株，占56.25％.结论：我国石家庄地区流行的32株艰难梭菌产毒株以A+B+的菌株为主，未发现产二元毒素的菌株.在该地区发现了12种不同的PCR核糖体型别，流行的菌株以SⅠ型为主(28％)，没有发现核糖型027和078型.艰难梭菌对克林霉素、左氧氟沙星、美洛培南均有一定耐药现象，未发现对甲硝唑、万古霉素、替加环素耐药的菌株.
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