【摘 要】
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背景:CUL4B是Cullin4B-Ring E3泛素连接酶复合体(CRL4B)的支架蛋白,在蛋白酶体降解途径中发挥重要功能。最近的研究表明,CUL4B亚细胞定位主要定位在细胞核,提示其具有独特的
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背景:CUL4B是Cullin4B-Ring E3泛素连接酶复合体(CRL4B)的支架蛋白,在蛋白酶体降解途径中发挥重要功能。最近的研究表明,CUL4B亚细胞定位主要定位在细胞核,提示其具有独特的核依赖功能。方法及结果:我们首先采用Pull-down结合质谱分析方法,在CUL4B相互作用蛋白中鉴定出EZH2,EED,RbAp48等多个转录抑制复合物PRC2组分;相互免疫共沉淀和FPLC分析证实CRL4B复合物与PRC2复合物存在相互作用;采用GST-Pull-Down实验证实CRL4B复合物与PRC2复合物相互作用是通过RbAp46/48与DDB1直接相互作用实现的。采用Gal4_DBD报告基因系统分析发现,CUL4B具有转录抑制作用,而且其发挥转录抑制作用依赖于CUL4B的DDB1结合结构域和cullin结构域,而且CRL4B复合物发挥转录抑制作用是通过单泛素化H2AK119实现的;抑制或敲除CUL4B基因不仅导致H2AK119ub减少,而且导致H3K27me3减少。ChIP-on-chip芯片分析表明存在大量CUL4B与PRC2复合物EZH2的共调控靶基因,这些靶基因参与许多重要的生物学功能,是重要的表观遗传学调控蛋白。结论:CUL4B协调PRC2共同参与基因的表观遗传调控。
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