【摘 要】
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鸭α干扰素真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以不同途径(基因枪轰击和肌注)免疫28日龄北京鸭,15天后接种DVH弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水,DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5,7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实验分别对免疫鸭外周血的C
【机 构】
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四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川雅安,625000 四川农业大学动物科技学院禽病防治
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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鸭α干扰素真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以不同途径(基因枪轰击和肌注)免疫28日龄北京鸭,15天后接种DVH弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水,DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5,7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实验分别对免疫鸭外周血的CD3+淋巴细胞总数、T淋巴细胞转化能力和外周血中和抗体的效价进行动态检测。结果:①CD3+淋巴细胞数量:6个实验组7-56 d极显著高于生理盐水对照鸭,显著高于(P≤0.05)空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组；6个实验组间差异不显著,100μg组于14-28 d略高于其他试验组。②T淋巴细胞对ConA的反应能力(OD值):6个实验组5-70 d极显著高于生理盐水对照鸭,21-56 d显著高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DulFN-α组；6个实验组间无显著差异。③中和抗体效价:7-70d时6个实验组问差异不显著,显著高于DHV和空载体+DHV组。研究表明基因枪轰击pcDNA-DuIFN-α可以显著增强DVH弱毒疫苗免疫鸭的细胞免疫水平,且优于肌注。
其他文献
将本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN吨)分别按每只50、100、200 μg3个剂量肌肉注射免疫北京鸭,以PBS、空载体质粒peDNA3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15 d后分经皮下、滴鼻,口服三个途径人工感染0.5 LD50鸭瘟强毒(含病毒DNA拷贝数为3.524×104),统计发病死亡情况,于攻毒后2 h、6 h、12 h、24 h、3 d、6 d、9 d、14
运用RT-PCR技术,首次从齐口裂腹鱼(Schizthorax prenanti)脑垂体扩增出生长激素(GH)完整开放阅读框(ORF),共633 bp,编码210 aa。分子进化分析表明其与草鱼和鲤鱼GH的进化关系较近,而与人类的GH基因进化距离较远。运用PCR技术从含齐口裂腹鱼GH开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共564 bp。将其定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)后在E.c
根据GenBank中发表的斑点又尾鲴干扰素基因序列设计一对引物,采用RT-PCR在斑点叉尾鮰淋巴细胞中克隆出了α-干扰素基因。序列分析显示与已发表的序列同源性在96.5％以上。同时将基因连接到原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组表达质粒,转入BL21经0.2mmol/L的IPTG诱导4小时后经SDS-PAGE分析,可见一约19KD的清晰蛋白带,用Bandscan软件分析蛋白表达量为48.4
通过RT-PCR方法,以5种鲤科重要经济鱼类。草鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、齐口裂腹鱼的垂体总RNA为模板扩增出其生长激素(fGH)的完整ORF序列并克隆到pMD18-T载体上并命名为pMD-1(草鱼)、pMD-2(鳙鱼)、pMD-3(鲫鱼)、pMD-4(鲤鱼),pMD-5(齐口裂腹鱼)。测序结果显示其长度均为633bp。序列分析表明,所有ORF序列均以ATG为起始密码,以TAG为终止密码,编码210个
白介素-18(IL-18)是近年发现的一种重要的细胞因子,具诱生IFN-γ、促进T细胞增殖分化、增强GM-CSF和IL-2的产生及NK细胞、CTL细胞的活性等生物学功能。因此,IL-18在增强免疫、抗微生物感染、抗肿瘤等方面有着广阔的应用前景。近年来,IL-18的研究主要集中于人和鼠方面,而对鸡IL-18的研究则起步较晚,直到Schneider K首次获得ChIL-18 cDNA,此后潘蔚绮等、刘
为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本文将pcDNA-SDIFN-α以每只50、100和200μg三个剂量用肌肉注射法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15 d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35、49、63、84、105 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT
观察重组鸭α-干扰素体内抗鸭乙型肝炎病毒的作用。采用DHBV阳性血清感染1日龄的北京鸭作为乙型肝炎动物模型,将重组鸭α-干扰素按500 U、1000 U、2000 U三个剂量分别对感染鸭进行肌注治疗15d,同时设立拉米夫定对照组和生理盐水对照组,用荧光定量PCR检测治疗前后和停药后鸭血清、肝、胰、肾、脾、肺、心、脑、十二指肠等组织中DHBV DNA含量的变化。结果显示:拉米夫定对照组于用药后,血清
为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(peDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35,49、63,84 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT法)测定鸭外周血
本文将GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射,6μg、3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫30日龄四川白鹅,以生理盐水和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,于免疫接种后1h、12h、1d、3d、7d、21d、35d、63d、105d和217d采集全血以及各组织器官,用免疫组织化学方法检测pcDNA-GPV-VP3在雏鹅体内表达的时相
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