【摘 要】
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研究Ⅳ型胶原酶消化时间，血清浓度对小鼠胰腺干细胞分离培养的影响，确定小鼠上皮样胰腺干细胞分离培养适宜的Ⅳ型胶原酶消化时间和血清（NBS）浓度。胰腺组织用0.1％Ⅳ型胶原酶消化不
【机 构】
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广东海洋大学农学院 广东湛江 524088
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜生态学分会第七届全国代表大会暨学术研讨会
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研究Ⅳ型胶原酶消化时间，血清浓度对小鼠胰腺干细胞分离培养的影响，确定小鼠上皮样胰腺干细胞分离培养适宜的Ⅳ型胶原酶消化时间和血清（NBS）浓度。胰腺组织用0.1％Ⅳ型胶原酶消化不同时间后，培养观察细胞生长状况及形态特征，并用含不同血清浓度的培养液培养胰腺干细胞，观察上皮样胰腺干细胞生长和增殖的情况。结果表明，用0.1％Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织，消化17-20min,上皮样胰腺干细胞少，成纤维细胞生长旺盛，干细胞易被挤侵；消化21-24min，上皮样胰腺干细胞多，培养9-10d呈鹅卵石样铺于皿底。在细胞原代培养时，在培养液中添加5％或10％的小牛血清（NBS），上皮样胰腺干细胞8-10d生长成片；添加15％或20％的NBS，成纤维细胞生长旺盛，干细胞无增殖空间。在细胞继代培养时，在培养液中添加5％的NBS，胰腺干细胞生长增殖缓慢，添加10-20％ 的（NBS，胰腺干细胞生长增殖快，以15％的NBS 浓度效果最好。小鼠胰腺干细胞分离培养适宜的Ⅳ型胶原酶消化时间为21-22min，适宜的NBS 浓度为 10％，按此法分离培养得到传至5 代的上皮样胰腺干细胞，并可分化为胰岛团样细胞。
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