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目的:探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷:5-aza)对苯处理大鼠骨髓细胞(BMC)周期的影响及其作用机制。
方法:以指数生长期的正常大鼠BMC作为空白对照组,以10 mmol/L苯处理BMC 24 h为苯处理组,苯处理后用10μmol/L 5-aza处理72h为苯+5-aza处理组;运用流式细胞术检测细胞周期变化,实时定量PCR检测Cyclin D1和p27mRNA表达的变化,Western blot检测Cyelin D1和p27蛋白表达的变化。
结果:与对照组比较,苯处理组细胞S期比例显著增高42.5%,G1期比例下降31.5%(P<0.01),同时伴随Cy(c)lin D1 mRNA和蛋白表达显著增加,p27 mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.01);与苯处理组相比,苯+5-aza处理组G1期比例上升52.7%,S期比例下降56.2%(P<0.01).同时伴随Cyclin D1/p27 mRNA和蛋白的表达发生显著性的逆转(P<0.01)。
结论:5-aza逆转苯所致的细胞周期改变,伴有Cyclin D1和P27表达改变。
方法:以指数生长期的正常大鼠BMC作为空白对照组,以10 mmol/L苯处理BMC 24 h为苯处理组,苯处理后用10μmol/L 5-aza处理72h为苯+5-aza处理组;运用流式细胞术检测细胞周期变化,实时定量PCR检测Cyclin D1和p27mRNA表达的变化,Western blot检测Cyelin D1和p27蛋白表达的变化。
结果:与对照组比较,苯处理组细胞S期比例显著增高42.5%,G1期比例下降31.5%(P<0.01),同时伴随Cy(c)lin D1 mRNA和蛋白表达显著增加,p27 mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.01);与苯处理组相比,苯+5-aza处理组G1期比例上升52.7%,S期比例下降56.2%(P<0.01).同时伴随Cyclin D1/p27 mRNA和蛋白的表达发生显著性的逆转(P<0.01)。
结论:5-aza逆转苯所致的细胞周期改变,伴有Cyclin D1和P27表达改变。