【摘 要】
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目的：探讨网膜脂肪来源的间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cell,ADSC)能否向CAFs方向分化以及相关激活机制.方法：取确诊卵巢癌且有网膜转移灶,确诊卵巢癌无
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科
【出 处】
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2015中国医师协会妇产科医师大会
论文部分内容阅读
目的：探讨网膜脂肪来源的间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cell,ADSC)能否向CAFs方向分化以及相关激活机制.方法：取确诊卵巢癌且有网膜转移灶,确诊卵巢癌无大网膜转移灶和因妇科良性疾病行手术治疗病人的大网膜标本行ADSCs原代培养,成脂肪、成骨诱导染色,流式细胞学检测细胞表面标记物CD90,CD 105,CD73和CD34的表达,观察不同来源的ADSCs的增殖情况,细胞组织化学法检测三组ADSCs中α-SMA的表达.免疫荧光免疫组化法检测与EOC细胞共培养的ADSCs细胞内α-SMA的表达情况,应用不同浓度的转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理ADSCs 1 d至8d行Western blot检测α-SMA和FAP的表达.用TGF-β1受体抑制剂(A83-01)处理ADSCs,再与SKOV3细胞共培养或外源性TGF-β1处理,行免疫组化、Western blot检测α-SMA和FAP的表达.建立卵巢癌裸鼠腹水瘤模型,腹腔注射SKOV3细胞,分别伴随注射无菌PBS、ADSCsα-SMA+、ADSCs、ADSCs+A83-01、CAFs和CAFs+A83-01.28天后处死裸鼠,评价腹水肿瘤结节重量和数量,免疫组化检测瘤组织α-SMA、MMP2和MMP9的表达.
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