【摘 要】
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目的 探讨自噬与凋亡在TOCP引发的神经毒性中的关系.方法 采用RNAi技术,构建pGenesil-1-Beclin1-shRNA真核表达载体；将重组质粒转染SH-SY5Y细胞,G418筛选稳定表达Beclin1-
【机 构】
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南华大学公共卫生学院,湖南衡阳421001
【出 处】
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2015毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会
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目的 探讨自噬与凋亡在TOCP引发的神经毒性中的关系.方法 采用RNAi技术,构建pGenesil-1-Beclin1-shRNA真核表达载体；将重组质粒转染SH-SY5Y细胞,G418筛选稳定表达Beclin1-shRNA细胞系,RT-PCR、Western blot检测Beclin1-shRNA细胞系Beclin1基因的mRNA、蛋白表达；不同浓度(0、0.25、0.50、1.0 mmol/L) TOCP处理Beclin1基因敲减SH-SY5Y细胞系48h,MDC染色观察自噬泡数量的变化,Hoechst33258染色观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测LC3、Bax、Bcl-2蛋白的表达.
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