林麝绿脓杆菌一个新抗性基因的发现

来源 :第二届中国西部动物学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengyq2000
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  林麝(Moschus berezovskii)是我国一级重点保护野生动物,其雄性个体分泌的麝香不仅是我国传统中药的重要成分,也是生产高级香水的重要原料。我国从1953年开始人工养麝,但到目前仍然没有形成规模化,其中疾病是林麝规模化养殖的重要制约因素之一。化脓性疾病是林麝的一种主要疾病,对圈养林麝威胁最大。我们之前的研究表明绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)是林麝化脓性疾病的主要致病菌之一,随着抗生素的广泛使用其抗性菌株的抗药性越来越多样化,多重化。尤其是由整合子介导的抗药菌株往往表现为多重抗药。本研究从32个林麝化脓组织中获得了8株绿脓杆菌,并用琼脂稀释法测定了常用6种抗生素的最小抑菌浓度。其中6株对一些氨基糖苷类抗生素和β-内酰胺类抗生素(头孢他啶和头孢噻肟)有较高的抗性,其中1株(MYL-7)还对阿米卡星有很高的抗性。检测菌株MYL-1发现其DNA 中有包含抗性基因aadA1和blaP2的Ⅰ类整合子。在MYL-7菌株中提取到一个大小为3000bp左右的新质粒(pCM7),当用引物hep74和hep51去扩增该质粒的Ⅱ类整合子基因盒区域时得到一个未知功能的大小为392bp的核苷酸序列。通过连接和转化实验最终确定该序列介导菌株对阿米卡星抗性。对该段序列推定的氨基酸序列做系统进化分析发现,该基因与aacA4基因聚在同一支,并且支持率高。由于用intI2F和intI2R去检测pCM7时并没有得到Ⅱ类整合酶基因,并且这个新的抗性基因不具有Ⅱ类整合子的特征位点(attI2位点)和基因盒的特征结构(attC位点),因此这个新的阿米卡星抗性基因可能并不位于Ⅱ类整合子中,它很可能介导一种新的抗性机制。
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