芝麻枯萎病病原菌的分离、鉴定及其生物学特性

来源 :中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lwk2293366
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  芝麻(Sesamum indicum L.)为重要的优质油料作物.近年芝麻枯萎病在河南省南阳市部分芝麻田块严重发生.为查明该病的病原,作者于2012年夏季在南阳市卧龙区采集芝麻枯萎病样品,用常规组织分离法对病原菌进行分离.将分离物移植于PDA平板,待产孢后进行单孢纯化.取单孢菌株ZY-2为供试菌,依据柯赫法则确认其对芝麻幼苗有致病性.该菌在PDA平板上菌落圆形,白色或粉红至紫红色.分生孢子梗瓶状(多短于25μm).小型分生孢子卵形至椭圆形或肾形,大小(7.3~18.0)μm×(3.3~5.7) μm(平均11.3μm×4.2μm).大型分生孢子镰刀形或新月状,具3~5个隔膜(多为3隔),大小(26.4~67.0)μm×(3.6~6.6)μm(平均40.3μm×5.4μm).顶细胞锥形,或弯曲成钩状,足细胞不明显.厚垣孢子顶生,间生或串生,卵形或近球形.用引物ITS1和ITS4扩增病原菌核糖体基因内转录间隔区(rDNA-ITS)序列,得到502bp片段(GenBank登记号:KF671955).用引物EF 1T和EF2T扩增病原菌转录延伸因子基因(tef基因)序列,得到673 bp片段(GenBank登记号KF690634).在构建的基于rDNA-ITS序列和tef基因序列的系统发育树中,供试菌与尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)分别在自举值95%和100%相聚一群.根据形态和系统发育分析结果,将供试菌鉴定为尖孢镰刀菌.该菌可在7~34℃(最适28℃)及pH2.5~9.5(最适6.5~7.5)中生长;在以蔗糖和葡萄糖为碳源的培养基上生长较快,以D-半乳糖为碳源的培养基上生长较慢;在以氯化铵、硝酸钠和L-组氨酸之一为氮源时生长较快,以磷酸二氢铵为氮源时则生长较慢;在以D-半乳糖和D-丙氨酸分别为碳源和氮源的培养基上产孢最多,而在以L-脯氨酸和葡萄糖分别为氮源和碳源的培养基上不产孢.
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