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根据已发表的烟草叶绿体序列(GenBank Z00044)设计引物，用PER方法获得两段烟草叶绿体同源重组序列LTR和RTR，克隆到T载体中，并将壮观霉素抗性基因aadA克隆到两段同源重组序列之间，以构建烟草叶绿体转化表达载体pRV1。aadA基因的启动子Prrn和终止子psbA基因3序列，分别从烟草叶绿体基因组中扩增而来。在此基础上，将约1.5kb的ω-3脂肪酸去饱和酶fad8基因与烟草叶绿体基因组启动子Prrn和终止子rpsl6基因3序列相连接，构建fad8基因表达盒，将其克隆到载体pRV1上，得到叶绿体转化载体pRVfad8。