【摘 要】
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目的 通过基因工程技术原核表达糠秕马拉色菌主要过敏原Mal f 1,结合生物信息学分析其抗原肽与MHCⅡ分子结合能力,对其过敏原性进行改造.为糠秕马拉色菌在特应性皮炎中的作用机制研究及临床诊断和免疫治疗等提供重要的物质基础.方法 对Mal f 1基因序列进行密码子优化,人工合成全基因片段.将Mal f 1基因与含有strepⅡ标签的表达载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行重组表
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院;中山大学生命科学院 广州医科大学附属第二医院
【出 处】
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中华医学会2014年全国变态反应学术会议
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目的 通过基因工程技术原核表达糠秕马拉色菌主要过敏原Mal f 1,结合生物信息学分析其抗原肽与MHCⅡ分子结合能力,对其过敏原性进行改造.为糠秕马拉色菌在特应性皮炎中的作用机制研究及临床诊断和免疫治疗等提供重要的物质基础.方法 对Mal f 1基因序列进行密码子优化,人工合成全基因片段.将Mal f 1基因与含有strepⅡ标签的表达载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行重组表达.使用生物信息学方法分析其抗原肽与MHC Ⅱ分子结合能力,通过定点突变技术,改造高值位点区域,构建含有突变型基因的表达菌株.优化菌株表达条件,亲和层析纯化蛋白,并通过免疫印迹法鉴定重组蛋白.
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