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目的：建立酶解法与LC-MS/MS结合的方法测定Beagle犬血浆中灯盏乙素苷元(由硫酸酯苷和/或葡萄糖醛酸苷酶解转化而成)的浓度,为开展Beagle犬经口给予灯盏花素的药代动力学研究提供分析检测方法.
方法：采用硫酸酯酶(含Glucuronidase100KU/ml和Sulfatase2000U/ml,批号SLBL1269V,美国sigma公司)酶解Beagle犬含药血浆中的灯盏花乙素,酶解后生成的苷元用乙酸乙酯进行液液萃取并测定,色谱柱为Agilent poroshell120SB-C18柱(2.7μm,50mm×4.6mm),流动相为0.1％甲酸甲醇-0.1％甲酸,梯度洗脱,流速0.3ml·min-1,柱温30℃,电喷雾离子化(ESI),多反应监测模式(MRM),灯盏乙素苷元[M+H]+：m/z=287.10/123.10,内标槲皮素[M+H]+：m/z=303.00/285.00.
结果：灯盏乙素苷元在7.60-488μg·L-1浓度范围内线性方程为Y=0.0114C+0.0051（r=0.9982，权重1/C2），最低定量限为7.60μg·L-1，日内与日间精密度均小于12.0%，目标物和内标提取回收率分别为86.62-94.07%、93.94-94.79%(n=6)，目标物和内标基质效应分别为101.98-102.65%、91.29-93.57%(n=6)，未处理血浆样品于室温、2-8℃放置24h、-200℃放置、30d、-20℃放置后室温冻融3次稳定性良好。
结论：本实验建立的测定方法特异性好，专属性强，灵敏度高，适用于灯盏乙素Beagle犬体内药代动力学研究，硫酸酯酶酶解专属性强，从实验结果可推测Beagle犬口服灯盏花素后，灯盏乙素在肠道菌群作用下水解产生的灯盏乙素苷元被吸收进入体循环的过程，主要是被硫酸酯化或／和葡萄糖醛酸化。