【摘 要】
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淀粉占小麦籽粒的60%～70%,它由两类高分子量葡萄糖聚合物组成,即线状葡聚糖组成的直链淀粉和分枝状聚合物构成的支链淀粉。普通小麦淀粉中含有20-30%的直链淀粉和70-80%的支链
【机 构】
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北京科技大学; 中国科学院遗传与发育生物学研究所;
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淀粉占小麦籽粒的60%～70%,它由两类高分子量葡萄糖聚合物组成,即线状葡聚糖组成的直链淀粉和分枝状聚合物构成的支链淀粉。普通小麦淀粉中含有20-30%的直链淀粉和70-80%的支链淀粉,而糯小麦由于缺失了合成直链淀粉必需的Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1基因,其淀粉几乎全部为支链淀粉而不含直链淀粉,在食品和工业应用中有大的应用价值和潜力。我们在前期糯小麦分子标记辅助选择育种的基础上,针对回交和自交后代中糯性位点选择效率低、检测成本高及标记有效性差等问题,建立了一套Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1基因的高效分子标记辅助选择方案。该方案基于Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1基因野生型和突变型序列的保守性和特异性,设计了一个包含4对7条引物的多重PCR扩增体系,用于鉴定三个糯性基因的等位变异。其中引物对Waxy-ABD用于扩增Wx-A1的野生型(241bp)和突变型(224bp)、Wx-B1的野生型(258bp)和Wx-D1的野生型和突变型(均为249bp);引物Waxy-B特异扩增W-B1的突变型(313bp);而另外两对Waxy-D引物分别特异扩增Wx-D野生型(271bp)和突变型(185bp)。该体系利用多重PCR手段实现一次PCR反应的同时对Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1基因进行基因型鉴定,在全糯小麦材料(Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1基因均为突变型)中可以扩增出185bp、224bp、249bp和313bp四条片段,在非糯小麦中扩增出241bp、249bp、258bp和271bp片段。扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,能够清晰地将各种条带分开,实现对Wx基因型的有效判别。目前,该体系已被用于多个糯小麦新品系的分子育种中,极大地提高了糯小麦新品种的育种效率。
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