杂交青龙斑性腺发育和生殖内分泌调控研究

• 作 者: 刘琼瑜;肖玲;李水生;刘晓春;张勇;林浩然;
• 机 构: 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室 水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁殖重点实验室 广州510275
• 出 处: 第五届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛
• 发表日期: 2014年期

　　三倍体的不育性,使得三倍体可以将更多的能量用于生长,并可避免产后免疫力低下易死亡和肉质改变的问题,从而获得优势物种,因此三倍体育种在鱼类遗传育种和生产应用方面发挥了重要的作用.本研究以杂交青龙斑三倍体和二倍体为研究对象,对它们的性腺发育和HPG轴相关重要基因的表达差异进行了研究,并与母本斜带石斑鱼进行了比较,结果如下：1.青龙斑二倍体雌性的卵巢发育良好,发育过程与斜带石斑鱼相似：10月龄时闭合卵巢腔形成,卵巢中以Ⅰ时相卵原细胞为主；18月龄时卵巢处于Ⅱ期,以处于小生长期的Ⅱ时相初级卵母细胞为主；30月龄时,卵巢发育到Ⅲ期,卵巢中Ⅲ时相卵母细胞占大多数,也有Ⅰ时相卵原细胞和Ⅱ时相卵母细胞,Ⅲ时相卵母细胞体积显著增大,细胞核居中,皮质滤泡开始出现；48月龄时,卵巢进入Ⅳ期,Ⅳ时相卵母细胞发育到Ⅳ时相晚期,细胞呈圆形,卵黄颗粒直径增大并充满细胞质,卵黄颗粒和油球清晰可见,双层滤泡膜和放射带存在.至此,青龙斑二倍体完成了卵黄积累的过程,达到了生长的成熟.2.跟踪了30月龄之前青龙斑三倍体的性腺发育过程,性腺从外观观察均属于性腺,三倍体卵巢的发育严重削弱,30月龄时卵原细胞发育到Ⅱ时相卵母细胞,其体积比18月龄青龙斑二倍体卵巢中的Ⅱ时相卵母细胞要小；相反,在另外一些个体中,卵巢中持续存在体积较小、呈囊状排列的细胞,类精子发生区域逐渐出现,30月龄时性腺中存在大量雄性生殖细胞,雄性生殖细胞发育水平处于精原细胞、初级精母细胞和次级精母细胞阶段,卵巢呈现类雄性化.3.用实时荧光定量PCR的方法对10月龄、18月龄、30月龄、48月龄杂交青龙斑及其母本HPG重要相关基因(GnRH、GtH、GtHR和Cyp19a1a)的表达差异进行了研究分析,从分子内分泌学机制上去探讨青龙斑三倍体的不育性：青龙斑二倍体GnRH基因的mRNA表达水平最高,青龙斑三倍体与斜带石斑鱼相近；相反,青龙斑三倍体FSHp、LHp、FHSR,LHR以及CYP19a1a基因的mRNA水平显著高于青龙斑二倍体和斜带石斑鱼,青龙斑二倍体GnRH、GtH、GtHR和Cyp19a1a基因表达水平与斜带石斑鱼相近,这与两者具有相似的性腺发育过程相一致.