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@@基于16S rRNA的研究表明，大约90％的环境微生物是“难培养微生物”，无法在实验室获得纯菌株。因此，上世纪90年代以来，“难培养微生物”的生理代谢及其环境效应，既是环境微生物领域的难点，也是热点。基于1958年DNA半保留复制著名实验的基本思路，研究者于2000年提出了“稳定性同位素核酸探针”的概念，拓展了复杂环境难培养微生物生理代谢的研究思路。