【摘 要】
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根据GenBank公布的隐孢子虫SSU rRNA基因序列设计一对引物，并以标准基因组DNA为模板，初步建立检测奶牛隐孢子虫的基于SYBR Green的Real-Time PCR方法，对奶牛微小隐孢子虫(c．parvum)和安氏隐孢子虫(C．andersoni)阳性样品和40份奶牛粪便进行检测。结果显示，此次建立的Real-Time PCR对C．parvum和C．andersoni均能扩增出曲线，且
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200232 南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会
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根据GenBank公布的隐孢子虫SSU rRNA基因序列设计一对引物，并以标准基因组DNA为模板，初步建立检测奶牛隐孢子虫的基于SYBR Green的Real-Time PCR方法，对奶牛微小隐孢子虫(c．parvum)和安氏隐孢子虫(C．andersoni)阳性样品和40份奶牛粪便进行检测。结果显示，此次建立的Real-Time PCR对C．parvum和C．andersoni均能扩增出曲线，且其他寄生虫(鸡贝氏隐孢子虫、弓形虫、新孢子虫)和大肠杆菌均未检测到；标准基因组DNA的检测阈值达到5个拷贝，牛粪中卵囊的最低检测量为5个，克粪便，用建立的Real-Time PCR法对上海40份奶牛粪便进行检测，结果奶牛粪便阳性率为15％(6/40).本研究建立了快速、特异、敏感的隐孢子虫荧光定量PCR检测方法、，可用于奶牛隐孢子虫流行病学调查。
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