【摘 要】
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以O78 禽致病性大肠杆菌(APEC)菌株培养上清浓缩获得的温度敏感血凝素分泌型蛋白(Tshs)为抗原,免疫BALB/c 小鼠,制备抗APEC-Tshs 单克隆抗体(McAb).以抗APEC-Tshs McAb包
【机 构】
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河北工程大学农学院分子生物学实验室,河北邯郸 056021
【出 处】
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第五届(2016)中国白羽肉鸡产业发展大会暨第四届全球肉鸡产业研讨会
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以O78 禽致病性大肠杆菌(APEC)菌株培养上清浓缩获得的温度敏感血凝素分泌型蛋白(Tshs)为抗原,免疫BALB/c 小鼠,制备抗APEC-Tshs 单克隆抗体(McAb).以抗APEC-Tshs McAb包被酶标板,初步建立了检测APEC-Tshs 抗体的夹心间接酶联免疫吸附试验(Si-ELISA)方法.结果表明抗APEC-Tshs McAb 抗体亚型为IgG1 型,滴度可达1∶105.夹心间接ELISA 包被稀释度为1∶3×104,抗原最适反应浓度和鸡血清最适稀释度分别为0.722μg/孔和1∶200,鸡血清最适孵育时间为30min,HRP-羊抗鸡 IgY 最适孵育浓度为1∶104,孵育时间30min；最适封闭液为0.5％BSA,封闭时间1h,酶作用底物最适反应温度为37℃避光反应10min.
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