【摘 要】
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本文成功建立了二取代indigoid化合物生物合成体系，以及从单一底物到双底物、从混合物到单一产物测试的蛋白激酶抑制剂筛选模式，获得了抑制GSK3比indirubin提高180倍的新型Indi
【出 处】
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2008(第四届)全国医药中间体研发进展及市场前景研讨会
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本文成功建立了二取代indigoid化合物生物合成体系，以及从单一底物到双底物、从混合物到单一产物测试的蛋白激酶抑制剂筛选模式，获得了抑制GSK3比indirubin提高180倍的新型Indigoid类化合物。本研究用新型基因替换技术成功构建了色氨酸酶阻断的trnA-菌株，用定向进化方法成功筛选到活力提高10倍，表达量达到5-10倍的突变株2A6 DM；并通过N端修饰进一步将表达量提高4倍。通过实验突破细胞色素P450 2A6只能催化小位阻底物羟基化的局限性，将底物适应范围扩大到卞氧基吲哚。本研究在此类反应中首次通过定向进化构建了反应位点由化学活性高的吡咯环向活性低的苯环改变的突变株，并显示了从分子水平研究和改造生物催化剂的巨大潜力；为研究构效关系、催化机理研究提供了新信息。
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