【摘 要】
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目的:研究SGK3基因过表达对乳腺癌细胞凋亡、侵袭转移能力的影响及其机制.方法:用基因克隆技术构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,利用重组质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白
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目的:研究SGK3基因过表达对乳腺癌细胞凋亡、侵袭转移能力的影响及其机制.方法:用基因克隆技术构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,利用重组质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;MTT法观察转染SGK3的细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况;Transwell细胞迁移实验检测SGK3过表达对细胞迁移能力影响;RT-PCR检测细胞凋亡、侵袭转移能力相关基因表达.结果:1.酶切鉴定、DNA测序证明成功构建重组质粒pEGFP-N1-SGK3.2.将重组质粒转染至MCF-7细胞,通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖.3.流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生.4.细胞迁移实验发现SGK3过表达的MCF7细胞运动迁移能力增强.5.SGK3过表达影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达,可使mmp2、mmp9的表达增强,而brms1表达无明显变化.结论:SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡,增强其迁移侵袭能力,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl表达、增强细胞运动迁移相关基因mmp2表达,增强其侵袭转移等恶性行为能力.
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