强阳离子交换-加压毛细管电色谱法分离多肽

来源 :第十一届有机分析和生物分析学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yukeno1
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毛细管电谱(CEC)将毛细管电泳(CE)的高柱效与高效液相色谱(HPLC)的高选择有机的结合在一起,克服了CE选择性差和分离中性物质困难,同时它采用电渗流(EOF)代替液压作为推动力,大大提高了液相色谱的分离效率.自从1974年Pretorius报道了第一篇关于CEC的研究以来,几个研究小组的工作充分显示了CEC优越的分离效率.目前CEC分离多在商用电泳仪或自制设备上实现,在实际操作中会遇到气泡问题,无法实现梯度洗脱等障碍,特别分离大分子复杂体系比较困难,因此CEC成功分离蛋白质、多肽等生物大分子的报道尚不多.天润通微分析公司研制出了世界第一台专用电色谱仪TriSep-2000GV系统.该系统采用电压和压力联合作为推动力,实现了加压毛细管电色谱(Pcec),克服了以上困难.离子交换色谱(IEC)自50年代开始应用于蛋白和多肽的分离,是一种分离带电大分子的有效手段,在CEC上采用阳离子或阴离子交换分离蛋白、多肽具有更大的优势.本文采用Pcec强阳离子交换柱(SCX)成功地分离了5种多肽.研究了离子强度、有机溶剂、pH和电压对分离的影响.
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