苯硼酸功能化聚合物微球的制备及其对糖蛋白的固相微萃取研究

来源 :第二十届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingwill
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  糖基化作为蛋白质最常见、最重要和最复杂的翻译后修饰之一,具有极其重要的生物学意义。目前发现的超过一半的癌症相关生物标志物都是糖基化蛋白[1]。因此,糖蛋白的研究对于临床疾病的早期诊断以及生物标志物的发现等具有极其重要的意义。然而,复杂生物样品中糖蛋白的含量过低,直接检测较为不易,如何从复杂体系中高选择性的分离富集糖蛋白,是糖蛋白质组研究首先要解决的一个关键问题。硼酸法是利用硼酸基团可以和糖蛋白中糖链上的顺式邻位或间位二羟基形成五元或六元环酯的原理对糖蛋白进行分离富集,该方法具有普适性强、能特异性富集所有类型糖型的特点[2]。本文以PGMA/EDMA微球为载体,通过表面引发原子转移自由基聚合将4-乙烯基苯硼酸(VPBA)接枝到微球表面,制备得接枝密度可控、对糖蛋白亲合作用较强的材料(如图1),并通过红外光谱(FTIR)和X 射线光电子能谱(XPS)对制得的材料进行了初步表征[3]。将此苯硼酸功能化的微球作为固相萃取基质,通过毛细管固相微萃取,对复杂样品中的糖蛋白进行分离富集,并对上样体积、上样溶剂pH、洗脱剂以及洗脱剂体积等固相微萃取条件进行了优化,结合高效液相色谱,对分离富集到的糖蛋白进行检测,建立了一种同时富集检测复杂体系中糖蛋白的方法。并采用此方法对蛋清样品中卵清蛋白(OVA)进行富集检测(如图2),由图可知,经富集后卵清蛋白的信号明显增强。表明该方法可以有效地对复杂体系中的糖蛋白进行富集检测。
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