黑曲霉阿魏酸酯酶A 的克隆、表达 及快速酶活检测体系的建立*

• 作 者: 张帅兵[1]裴小琼[2]吴中柳[2]
• 机 构: 中国科学院成都生物研究所成都610041；中国科学院研究生院北京100049
• 出 处: 第三届全国研究生生物质能研讨会
• 发表日期: 2004年期

阿魏酸酯酶是参与半纤维素降解的重要酶类。为了能够利用分子生物学手段提高阿魏酸酯酶的活性和各项性能，我们利用RT-PCR技术从黑曲霉CIB 423.1 中克隆了编码阿魏酸酯酶A的cDNA，构建了外泌表达的质粒，并将其转化到毕赤酵母GS115 进行表达，通过检测培养液上清中的酶活，表明已成功利用这一体系表达了活性阿魏酸酯酶。同时，我们还建立了快速、稳定的酶活检测体系，使后续对阿魏酸酯酶酶突变体活性进行高通量筛选成为可能。