【摘 要】
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目的 检测常氧培养条件下口腔鳞癌细胞HSC3中Toll样受体3、4(Toll like receptor 3,4,TLR3,TLR4)的表达水平,并进一步探讨低氧微环境对其表达可能的影响.方法 常氧条件下,将口腔鳞癌细胞HSC3培养至指数增长期,收集细胞,采用Real-time PCR方法在mRNA 水平检测TLR3、4的表达,继之,采用Western blotting在蛋白水平检测其表达.模拟体
【机 构】
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南京市口腔医院口腔颌面外科 南京市第二医院肿瘤内科
【出 处】
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第九次全国口腔颌面-头颈肿瘤学术研讨会
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目的 检测常氧培养条件下口腔鳞癌细胞HSC3中Toll样受体3、4(Toll like receptor 3,4,TLR3,TLR4)的表达水平,并进一步探讨低氧微环境对其表达可能的影响.方法 常氧条件下,将口腔鳞癌细胞HSC3培养至指数增长期,收集细胞,采用Real-time PCR方法在mRNA 水平检测TLR3、4的表达,继之,采用Western blotting在蛋白水平检测其表达.模拟体内低氧微环境,在体外采用1％O2浓度分别刺激细胞0、3、6、12及24h,采用Real-time PCR方法在mRNA水平检测TLR3、4的表达变化,进一步通过Western blotting在蛋白水平检测其表达改变.结果 在常氧培养条件下,HSC3细胞中可检测到TLR3和TLR4的表达.采用低氧刺激可以显著促进TLR3,TLR4的表达水平,其中低氧刺激24h后,与对照组相比,实验组TLR3的蛋白表达水平增高至6.2±0.1倍,而TLR4在低氧刺激6h 后蛋白表达水平可增高至5.6±0.1倍,其结果在统计学上具有显著性差异(p＜0.05).结论 口腔鳞癌细胞HSC3在常氧培养下可检测到TLR3、TLR4的表达,肿瘤低氧微环境可进一步促进其表达水平.
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