【摘 要】
：
本研究采用PCR方法对62株大肠杆菌菌株进行stx基因检测,将筛选到的溶源菌进行噬菌体的诱导、分离和纯化,利用自行制备的Stx2溶源性MC1061作为指示菌筛选Stx1噬菌体,并对相关基因进行了测序鉴定,研究发现选择作为实验材料的这8株O157溶源菌存在优先释放Stx2噬菌体,不释放Stx1噬菌体的现象.本研究有助于从一个全新的角度来诊断、监测和预防大肠杆菌O157.
【机 构】
：
上海交通大学农业与生物学院,上海,201101 上海市畜牧兽医站,上海,201103
【出 处】
：
中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
论文部分内容阅读
本研究采用PCR方法对62株大肠杆菌菌株进行stx基因检测,将筛选到的溶源菌进行噬菌体的诱导、分离和纯化,利用自行制备的Stx2溶源性MC1061作为指示菌筛选Stx1噬菌体,并对相关基因进行了测序鉴定,研究发现选择作为实验材料的这8株O157溶源菌存在优先释放Stx2噬菌体,不释放Stx1噬菌体的现象.本研究有助于从一个全新的角度来诊断、监测和预防大肠杆菌O157.
其他文献
以牛分支杆菌vallee株基因组DNA为模板,应用PCR法扩增hsp65和esat6两个基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建原核重组表达质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导(终浓度1mmol/L),进行SDS-PAGE电泳分析,结果表明:
目的:克隆表达牛分枝杆菌持续感染相关蛋白PCAA,并鉴定其免疫活性.方法:以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷-分枝菌酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达重组融合蛋白,并利用Ni亲和层析的方法纯化出重组蛋白.再通过免疫印迹鉴定其免疫活性.结果:扩增出了牛分枝杆菌中pcaA基因并纯化出了重组的融合蛋白,
通过耐药表型及基因型检测对临床分离的41株葡萄球菌进行了鉴定,鉴定出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)16株,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)4株.耐甲氧西林葡萄球菌阳性率达到48.8％,这提示兽医临床必须提高对MRS的重视,并为临床鉴定耐甲氧西林葡萄球菌提供了可借鉴的方法.
为评价纳豆芽胞杆菌对黄羽肉鸡生产性能及免疫功能的影响.270只1日龄肉公雏分别给予不同剂的纳豆芽胞杆菌,并观察饲养周期内生产性能及对新城疫疫苗免疫的抗体水变化.研究结果显示,添加不同浓度的纳豆芽胞杆菌对黄鸡的总增重有不同的促进作用,但以10％fu/g、107cfu/g二个浓度组效果最好,28日龄体重分别比对照组提高7.54％和9.37％,且这两个浓度的纳豆芽胞杆菌可以明显提高胸腺、脾脏和法氏囊等的
项目组成员制备了四批牦牛大肠埃希氏菌病灭活疫苗.制备了氢氧化铝胶佐剂和培养基,对4批牦牛大肠埃希氏菌的菌液培养、纯粹检验、活菌计数、灭活及无菌检查、配苗及半成品检查、分装及成品检查表明:无菌检验为阴性;物理性状检验为:静置后上层是淡黄色的澄明液体,下层为灰白色沉淀,振荡后呈均匀混浊液;牦牛安全检验结果为安全;牦牛效力试验有效.牦牛大肠埃希氏菌病灭活疫苗为免疫预防该病打下了良好的基础.
从黑龙江杜尔伯特蒙古族自治县某牛场病死的犊牛分离到一株疑为产肠毒素大肠杆菌的菌株.通过微生物学和PCR鉴定,确定为产ST肠毒素的大肠杆菌F41菌株,同时也表明PCR方法具有较好的敏感性和特异性,在临床上有较好的应用价值.
根据NCBI的mrkA菌毛结构基因DNA序列,在其菌毛蛋白序列设计了两条引物,经PCR扩增从10株临床分离株基因组DNA中得到5个大小在543 bp左右的阳性产物,经纯化、连接、转化、筛选及核序列测定与分析,确认所克隆的外源基因与NCBI的mrkA蛋白结构基因序列基本一致.
为了鉴定从狮头鹅心血中分离到的芽胞杆菌,进行了一系列生理生化试验和动物致病性试验.根据试验结果及可鉴定该芽胞杆菌为栗褐芽胞杆菌.同时,提取了该芽胞杆菌的基因组DNA,用细菌16S rRNA基因的通用引物,经PCR方法成功扩增出其部分16S rRNA基因,克隆后测序表明其全长1516 bp,G+C含量为55％.BLAST在线分析显示其与栗褐芽胞杆菌的16S rRNA基因序列一致性＞99.5％,从分子
通过克隆PhiX174裂解基因E,将其连入pMD18T,构建产生大肠杆菌细菌膜影克隆载体,并将测序正确的片断插入温控表达载体pBV 220和融合表达载体pGEX-3X,为大肠杆菌细菌膜影的研究奠定基础.
目的利用标记有特异性探针的基因芯片同时检测不同浓度的七种动物源性致病菌,并与常规金标准、PCR方法和Mini VIDAS等快速检测方法相比较,验证基因芯片检测动物源性致病菌的特异性和灵敏度.方法制备101～105 cfu/mL的菌液和七种动物源性致病菌的模拟样品,采用基因芯片、常规金标准、PCR方法和Mini VIDAS法同时对菌液和模拟样品进行检测.结果基因芯片可同时检测七种动物源性致病菌,其检