【摘 要】
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目的 观察体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰持续阶段IGF2的表观遗传修饰作用.方法 应用荧光定量PCR检测IGF2的mRNA表达,甲基化特异性P
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院毒理学系,广州 510515
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目的 观察体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰持续阶段IGF2的表观遗传修饰作用.方法 应用荧光定量PCR检测IGF2的mRNA表达,甲基化特异性PCR(MSP)检测IGF2启动子区的甲基化水平改变,染色质免疫沉淀(ChIP)结合定量PCR检测其启动子区的组蛋白修饰情况,包括组蛋白H3、H4乙酰化,H3(Lys4)及H4(Lys20)甲基化修饰.结果 在细胞复制性衰老过程中,中年细胞组、复制性衰老细胞组IGF2的mRNA表达水平升高,早衰持续组升高显著,为年轻细胞组的5.23倍；在细胞衰老过程中,IGF2启动子区-658 bp～-456 bp仅在复制性衰老细胞组具有一定的甲基化水平；复制性衰老细胞组的组蛋白修饰在启动子区-856 bp～-634 bp以H4乙酰化和H3(Lys4)甲基化修饰为主；在第一外显子区+9 bp～+145 bp的修饰,复制性衰老细胞组受组蛋白H3(Lys4)及H4(Lys20)荦基化联合修饰,早衰持续组以H3(Lys4)甲基化修饰为主.结论 在细胞衰老过程中,IGF2的启动子区甲基化修饰与其mRNA表达水平无明显关联,而组蛋白修饰联合调控mRNA的表达,细胞复制性衰老与早衰的内在表观遗传修饰机制存在差异.
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