多孔二氧化硅与阿司匹林/BMP基因复合促骨再生作用的研究

来源 :2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wqsemail
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  目的:考察多孔二氧化硅纳米粒子与药物阿司匹林/BMP基因复合后体内、外促骨再生作用.材料与方法:以阿司匹林为原料合成碳点;采用反相微乳液法,以CTAB作为表面活性剂、氨水作为催化剂、TEOS和APES作为硅源,合成多孔二氧化硅纳米粒子,并将聚乙酰亚胺修饰在粒子表面.采用透射电镜观察粒子形貌、动态光散射测得粒子电势,利用紫外测得材料的载药率和释放曲线,通过琼脂糖凝胶电泳成像考察材料与质粒的结合能力,通过荧光倒置显微镜观察转染效率.体外通过real-time PCR检测炎症环境下阿司匹林碳点对炎症因子的抑制作用.体内建立大鼠头盖骨临界骨缺损模型,将制备的二氧化硅/阿司匹林/BMP基因复合物与明胶海绵复合后,植入骨缺损处,分别于6周、12周对大鼠灌流固定处死,Micro-CT检测缺损处新骨形成情况.结果:透射电镜下观察所合成的阿司匹林碳点与多孔二氧化硅纳米粒子尺寸分别为3-5nm和100-200nm,分散性较好,尺寸较为均一.紫外测得该载体在前8小时释放较快,释放药物可达载药量的60%,随时间延长,药物持续释放但释放速度减慢,到48小时时,可释放载药量的85%.凝胶电泳成像结果显示,当二氧化硅与质粒质量比为10∶1及以上时,泳道上无条带显示,证明材料与质粒完全结合.倒置荧光显微镜下观察,在所测试的三组质量比中,随质量比增加,转染效率提高,质量比为30∶1组转染效率最高.体外real-time PCR结果显示,在LPS刺激Raw264.7细胞诱导炎症环境下,阿司匹林药物与阿司匹林碳点均可抑制炎症因子的产生,其中阿司匹林碳点对IL-1β、TNF-α和MMPs的抑制作用要优于单纯阿司匹林药物.体内动物实验Micro-CT结果显示,术后12周时载BMP组中央形成明显大块的骨片,BMP基因与阿司匹林双载组缺损中央有大量骨片形成,软件分析新形成骨面积可达到70%.结论:制备的多孔二氧化硅纳米粒子具有较好的药物负载和基因转染能力,与药物阿司匹林和BMP基因复合后具有较好的体内促成骨效果.
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