【摘 要】
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去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10)在Notch信号转导途径的活化以及小鼠胚胎发育过程中发挥了重要作用.但是,ADAM10如何调节成年小鼠大脑中Noah信号转导途径的活性并对神经
【机 构】
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福建医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学系,福建医科大学细胞与发育工程研究中心,福建医科大学干细胞工程与再生医学福建省高校重点实验室,福州 350004
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10)在Notch信号转导途径的活化以及小鼠胚胎发育过程中发挥了重要作用.但是,ADAM10如何调节成年小鼠大脑中Noah信号转导途径的活性并对神经干细胞增殖和分化的影响迄今不清楚.为此,我们利用建立的成年大脑神经细胞特异性条件性ADAM10基因敲除小鼠(cKO)模型进行研究.采用Western Blotting方法检测10只4月龄ADAM10 cKO小鼠和对照组小鼠的大脑皮层和海马组织,观察Notch1受体S2位点水解片段和胞内活性片段(NICD)的含量变化；通过荧光定量PCR技术检测8只4月龄ADAM 10 cKO小鼠和对照组小鼠,测定其大脑皮层和海马组织中Notch1受体下游靶基因hes1、hes5、hey1和hey2的表达量；采用免疫组织化学方法检测12只4-5月龄ADAM10 cKO小鼠和对照组小鼠的大脑皮层和海马组织,分析神经干细胞的增殖和分化.结果表明,在ADAM10 cKO小鼠海马组织中,Notch1受体S2位点蛋白水解片段和NICD片段与对照组小鼠相比,分别降低88.9％和71.4％；而在大脑皮层中,Notch1受体S2位点蛋白水解片段比对照组小鼠降低73.9％,但是,NICD片段的含量无明显变化,并且,在两种组织中,均未见Notch1受体S1水解片段出现明显的蓄积现象.在ADAM 10 cKO小鼠海马组织中,Notch1受体下游靶基因hes1,hes5,hey1和hey2的表达与对照组小鼠相比,分别降低56.6％,55.5％,39.3％和43.5％.免疫组织化学的研究结果表明,在ADAM10cKO小鼠的大脑海马颗粒细胞下层中,神经干细胞的数目减少,向成熟神经细胞的分化增多,并向颗粒细胞层迁移.总之,这些研究结果证实ADAM10对成年小鼠神经细胞的Notch1信号转导途径具有明显的调节作用,控制着神经干细胞的增殖和分化,对维持成年期大脑神经细胞的稳态发挥了重要作用.
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