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把PRV(JS-2012株)gE主要抗原表位区核苷酸克隆到pCold-TF原核表达载体中，将重组质粒转化到BI21(DE3)大肠杆菌中，在lmM IPTG、16℃条件下诱导24小时。离心收集的菌液用超声破碎后，SDS-PAGE鉴定结果显示目的蛋白为可溶性表达。用His标签的磁珠将目的蛋白纯化并加佐剂乳化，免疫6周龄BALB/c雌性小鼠，四次免疫后取脾细胞与SP2/0细胞融合。用间接EUSA和IFA筛选后，取阳性孔细胞做3-4轮亚克隆，最终筛选到4株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，分别命名为5C3、5B2、2E5和6E6。将O.1MOI PRV病毒接于Vero细胞，18h后用IFA和Westem-Blot检测单克隆抗体与病毒的反应性。IFA实验结果显示四株单克隆抗体均能与PRV反应，但与gE缺失的疫苗毒Bartha-K61株无反应。结果显示，5C3和2E5单克隆抗体能与PRV反应，而与Bartha-K61株无反应，5固和6E五单克隆抗体与两个毒株均无反应。本研究获得了4株能稳定分泌PRV(JS-2012株)gE单克隆抗体的杂交瘤细胞，产生的抗体均具有良好的特异性。这些特异性单克隆抗体为研究伪狂犬病病毒以及建立伪狂犬病的诊断方法提供了良好的工具。