let-7b调控TLR4表达对幽门螺杆菌感染的免疫调节机制

来源 :2013中华医学会北京分会消化系病学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuyueguangxuan
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目的:本研究在体外培养的胃上皮细胞中探讨let-7b参与调控H.pylori感染后对TLR4及其下游基因表达的影响。方法:采集15例H.pylori阳性病人,8例H.pylori阴性对照病人胃粘膜活检标本。定量RT-PCR,检测let-7b在胃窦粘膜标本及H.pylori 26695感染的胃上皮细胞AGS,GES-1中的表达;通过靶基因预测软件寻找let-7b的潜在靶基因,构建双荧光报告载体,荧光素酶活性测定和蛋白质印迹验证靶点;细胞转染let-7b模拟物或抑制剂,检测H.pylori感染后对TLR4表达的影响,检测NF-xB活性和下游基因表达。结果:let-7b在H.pylori阳性胃窦粘膜组织标本和H.pylori感染的胃上皮细胞系(AGS.GES-1)中的表达显著下调;TLR4在H.pylori感染的胃上皮细胞中的表达上调;let-7b与TLR4 mRNA 3-UTR部分互补,通过转录后抑制靶向调控TLR4的表达;过表达let-7b下调TLR4,MyD88, NF-xB1/p50,RelA/p65,减弱NF-xB的转录活性,并抑制其下游基因IL-8,COX-2和CyclinDl的表达。结论:let-7b靶向调控TLR4的表达,调控NF-xB的转录活性以及其下游基因的表达,参与幽门螺杆菌感染后的免疫炎症反应。
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