【摘 要】
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指数级富集配体的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)是20世纪90年代初建立的一项新的文库筛选与PCR扩增相结合的组合化学生物学技术.SELEX利用人工合成的容量约为1014–1015随机寡核苷酸文库,通过体外多轮筛选与扩增,指数富集能与靶分子特异结合的寡核苷酸,获得特异性强、亲和力高的单链D
【机 构】
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中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,中国科学院南海海洋研究所,广州,510301;中国科学院大学,北京,100049
【出 处】
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“全球变化下的海洋与湖沼生态安全”学术交流会
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指数级富集配体的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)是20世纪90年代初建立的一项新的文库筛选与PCR扩增相结合的组合化学生物学技术.SELEX利用人工合成的容量约为1014–1015随机寡核苷酸文库,通过体外多轮筛选与扩增,指数富集能与靶分子特异结合的寡核苷酸,获得特异性强、亲和力高的单链DNA 或RNA适配体(aptamers).利用SELEX技术筛选获得的适配体识别分子模式与抗体类似,但与蛋白质类抗体相比,核酸类配基具有更多的优越性,如不受免疫条件和免疫原性限制,可以体外人工合成,变形与复性可逆等.SELEX技术具有库容量大、靶分子范围广、亲和力高、特异性强等优点,在基因调控、蛋白质组研究、疾病诊断治疗与新药研发等方面具有广阔的应用前景.本研究利用SELEX技术筛选获得6个能与石斑鱼虹彩病毒SGIV特异性结合的单链DNA适配体.这6个DNA适配体均可显著性抑制SGIV病毒在体外培养石斑鱼细胞中的复制,而且对培养细胞无任何毒副作用.体内抗病毒感染实验表明,石斑鱼分别腹腔注射适配体LMB761和LMB764后,可分别减少由SGIV感染引起的死亡率40％和30％.我们的研究首次证实了可运用SELEX技术筛选与海洋鱼类大分子DNA病毒特异性结合的核酸适配体,研究所获得DNA适配体可作为海洋鱼类抗病毒候选药物和病毒检测,具有重要应用前景.
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