实时荧光定量PCR检测犬乳腺肿瘤VEGF基因表达标准品质粒和标准曲线的构建

来源 :全国兽医外科学第13次学术研讨会、小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ktcalf
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为了准确地分析血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在犬乳腺肿瘤形成过程中的作用,建立了乳腺肿瘤VEGF基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法.本试验设计了针对犬VEGF的特异性引物,提取乳腺肿瘤组织RNA并扩增出目的片度,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定证实重组质粒构建成功.利用实时荧光定量RT-PCR技术对基因mRNA的表达水平进行研究非常可靠,研究结果具有可比性和重复性.为下一步对不同犬乳腺肿瘤组织中VEGF基因表达的定量打下了基础.
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