【摘 要】
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无核葡萄在鲜食和制干方面占有重要的位置,也是育种研究的一个重要方向.由于无核葡萄的合子胚在发育过程中发生败育,利用常规手段选育无核葡萄时要以无核葡萄为母本,且后代无核概率低,育种年限长.而利用胚挽救技术可以在胚败育前将胚珠离体培养,来获得新的杂交后代,提高无核概率,且缩短育种年限.而确定胚败育的时间是胚挽救成功的关键,因此通过研究无核葡萄胚败育时间(即取样时期),可以有效提高胚挽救育种效率.进而为
【机 构】
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西北农林科技大学园艺学院,旱区作物逆境生物学重点实验室,陕西杨凌712100
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无核葡萄在鲜食和制干方面占有重要的位置,也是育种研究的一个重要方向.由于无核葡萄的合子胚在发育过程中发生败育,利用常规手段选育无核葡萄时要以无核葡萄为母本,且后代无核概率低,育种年限长.而利用胚挽救技术可以在胚败育前将胚珠离体培养,来获得新的杂交后代,提高无核概率,且缩短育种年限.而确定胚败育的时间是胚挽救成功的关键,因此通过研究无核葡萄胚败育时间(即取样时期),可以有效提高胚挽救育种效率.进而为胚挽救技术体系的优化提供重要的参考价值,以便更有效的为新品种的选育创制材料.本试验于2016年4月至2017年3月完成,供试的材料均以无核为母本,以无核、有核和中国野生种为父本,共设置了14个组合.胚挽救试验在旱区作物逆境生物学国家重点实验室完成,胚挽救杂交部分花粉在西北农林科技大学葡萄种植资源圃采集,田间杂交试验在新疆维吾尔自治区鄯善葡萄瓜果研究开发中心完成.选取已开花10％的花序,放入冰盒带回实验室剥出花药,晾干花粉后研磨备用.在开花前2d对母本去雄并套袋,去雄后3d开始,待花柱上有粘液分泌时选择早晨授粉,连续授粉3次.不同时间取样：以昆香为母本的取样时间为授粉后47、48、49、50、51、52和53 d,以红宝石无核为母本的最佳取样时间为授粉后52、53、54、55、56、57和58 d,以火焰无核为母本的最佳取样时间为授粉后37、38、39、40、41、42、43 d.所用的胚发育培养基为改良MM3+0.5 g·L-1水解酪蛋白+0.1 g·L-1肌醇.胚萌发培养基为WPM+6-BA 0.2 mg·L-1+0.1 g·L-1肌醇.继代培养基为1/2MS+IAA 0.3 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+活性炭1 g·L-1+琼脂7 g·L-1.结果显示,通过胚挽救技术一共获得杂交组合幼苗1 631株.通过比较红宝石自交组合在授粉后56 d时成苗率最高,红宝石无核×爱神玫瑰杂交组合在授粉后57 d时成苗率最高,火焰无核×红宝石无核杂交组合在授粉后40 d时成苗率最高,火州红玉×红宝石无核杂交组合在授粉后35 d时成苗率最高.以早熟材料为代表的火焰无核,其连续7d取样后,离体培养的胚珠随着取样时间的推移,胚珠败育程度加深,胚珠变褐皱缩.以晚熟材料为代表的红宝石无核胚珠在表型上并未发生明显的变化.通过无核探针GLSP1对火焰无核×双优杂交后代23株中有无核探针标记的为15株.火焰×红宝石无核杂交后代52株中检测出携带无核探针标记的为38株.通过SCAR标记SCF27在红宝石无核x火焰无核杂交后代364株中检测出携带无核标记基因238株.
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