【摘 要】
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目的:通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展
【机 构】
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海南省人民医院儿科海南省妇幼保健院湖南省人民医院中南大学湘雅二医院海南医学院,海南海口570311
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目的:通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究奠定基础.方法:构建小鼠VDR特异性siRNA表达载体并测序,进行人EC/鼠EC的培养,进行SiRNA转染试验,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,Western blot进行鉴定.结果及结论:成功完成了人EC/鼠EC的培养、转染及转染干预,并行Western blot鉴定,发现抑制效率明显的为鼠EC1号质粒组。表明针对鼠VDR基因的siRNA表达载体有很强的特异性,并对VDR基因干扰的位点不同表现的抑制效应不一。
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