【摘 要】
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为考察人细胞中的代谢细胞色素P450 4A11(CYP4A11)基因表达受抑制之后是否会影响血管相关收缩因子的表达,通过在线设计多个抑制细胞中代谢酶CYP4A11基因表达的siRNA并通
【机 构】
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广州军区广州总医院药剂科,中国广东 广州 510010
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为考察人细胞中的代谢细胞色素P450 4A11(CYP4A11)基因表达受抑制之后是否会影响血管相关收缩因子的表达,通过在线设计多个抑制细胞中代谢酶CYP4A11基因表达的siRNA并通过Blasting验证,选择效果好的三对siRNA合成并转染至EA.hy926细胞株,通过荧光染色和定量多聚酶链反应(quantitative polumerase chain reaction,qPCR)初步检测,再采用表达量相对更高的MG63细胞系通过qPCR与蛋白质印迹法(Western blotting,Western-blot)进行验证,检测发现25nmol/L的siRNA2抑制效果最好.使用25nmol/L siRNA2抑制CYP4A11在EA.hy926细胞株中的表达后,通过qPCR与Western-blot发现促血管收缩相关因子内皮素1受体(Endothelin 1 receptor,ET1R)、血管紧张素1型受体(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)表达下调(P<0.05),而内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达显著上调(P<0.001).因此,siRNA2能通过显著抑制在EA.hy926细胞中CYP4A11的表达,并因此显著调节血管紧张的相关指标,有促血管松弛作用的趋势.
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