论文部分内容阅读
目的 建立目标基因测序技术,对后纵韧带骨化(ossification of the posterior longitudinal ligament,OPLL)患者的11个已知致病基因进行突变筛查,探讨OPLL与致病基因突变的关系。方法 提取6例OPLL患者外周血全基因组DNA,利用GenCap目标基因捕获技术(北京迈基诺公司),设计骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、骨形态发生蛋白-4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)、骨形态发生蛋白-9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)、Ⅺ型胶原蛋白α2(collagen type Ⅺ alpha 2,COL11A2、Ⅵ型胶原蛋白α1(collagen type Ⅵ alpha 1,COL6A1)、核苷酸焦磷酸酶(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 1,ENPP1)、成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)、转化生长因子-β3(transforming growth factor beta 3,TGFB3)和转化生长因子-β受体2(transforming growth factor,beta receptor Ⅱ,TGFBR2)基因外显子区域特异性捕获探针,与基因组DNA文库进行杂交,将目标基因组区域的DNA片段进行富集后,再利用iUumina hiseq2000第二代测序仪进行测序,通过数据分析,确定突变位点,对选定的突变位点用Sanger测序法进行验证。