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背景 肌细胞增强因子2D (myocyte enhancer factor-2D,MEF2D)属于转录调节因子MADS-box家族,最初被认为是肌细胞特异性DNA结合蛋白,其蛋白多结合在许多肌特异性基因的调控区域控制转录过程,发挥控制肌细胞分化过程中的基因转录功能。最近的研究表明,MEF2D还参与了多种细胞的信号传导过程,在调节细胞分化、增殖、存活和凋亡等方面发挥着重要的作用。在一些脑退行性疾病细胞和动物模型(如Alzheimers disease,Parkinsons disease)中,抑制MEF2D活性可加速神经元凋亡,激活MEF2D可发挥神经保护作用。目的 本研究旨在观察大鼠脑缺血损伤后MEF2D在脑内不同部位的表达变化,分析其在脑缺血损伤后脑内神经干细胞增殖、迁移和分化过程中的表达规律,为进一步研究MEF2D在脑缺血缺氧损伤后神经发生中的作用提供实验依据。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型,BrdU掺入法标记脑内增殖细胞,实时定量PCR和Western Blot方法分别从mRNA和蛋白水平检测MEF2D在缺血核心区和半暗带皮质、纹状体、侧脑室室下区(subventricular zone,SVZ)、海马和齿状回的表达。采用免疫组织化学荧光多重标记技术观察MEF2D在成熟神经元、SVZ和齿状回的增殖细胞及其分化和迁移神经元中的表达变化。结果 正常大鼠脑内各个脑区均有较低水平的MEF2D表达。脑缺血后,在缺血对侧的皮质、纹状体和海马内MEF2D表达水平显著增高,于缺血后3d达表达高峰,提示缺血损伤的应激可促进这些脑区内的MEF2D表达。然而,在缺血侧的缺血核心区、半暗带皮质和纹状体,MEF2D表达显著下调。缺血侧SVZ和齿状回的MEF2D表达显著增高,且高表达于两个区域的BrdU染色阳性细胞内,随着这些增殖细胞的神经分化,MEF2D持续高表达于SVZ和迁移的DCX阳性细胞内,随着这些细胞的逐渐分化成熟,Tuj1和NeuN染色阳性神经元内的MEF2D表达水平逐渐下降至较低水平。结论 MEF2D在大鼠局灶性脑缺血损伤后脑内不同区域显示了不同的表达变化规律,提示了MEF2D可能参与了脑缺血后神经元凋亡与存活的调节。而在缺血后脑内神经发生区表达的上调及其变化,提示MEF2D可能参与了脑缺血后神经干细胞的增殖和分化的调节,其具体机制需要进一步研究。