eRF3b/GSPT2(1381-1531)的克隆表达、蛋白纯化

来源 :第三届晋冀鲁豫流行病学学术会议暨2010流行病学郑州论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fossi
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乙型病毒性肝炎世界范围内流行,是已知各型肝炎中危害最严重的一种。目前全世界范围内约有3.5亿慢性乙肝感染者,其中15%-25%将发展并最终死于相关的肝损伤、肝硬化和肝细胞癌,严重威胁人们的健康。而我国是世界上的肝炎大国,情况更加严重,其总的感染率为57%,在乙型肝炎及相关疾病的l临床诊治过程中,最为棘手的一个问题就是诊断不清。我室前期利用MALDI-TOF MS技术发现eRF3b/GSPT2(1381-1531)在乙型肝炎不同病程中的表达存在差异。为进一步验证并且达到早期诊断,我们进行了基因的克隆,蛋白表达纯化,为下一步制备相应的抗体作准备。从全血中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出eRF3b/GSPT2基因,测序正确后,将eRF3b/GSPT2(1381-1531)基因克隆于表达载体pGEX-4T-1中,经IPTG诱导表达目的蛋白,并通过GST亲和层析柱获得纯化的蛋白。
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