【摘 要】
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SARS-CoV属于单股正链RNA病毒,其刺突蛋白S为其最重要的结构蛋白,参与病毒与细胞受体的结合以及入侵宿主细胞的膜融合过程,决定着病毒的组织嗜性和毒力.目前对SARS-CoV基因组
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
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SARS-CoV属于单股正链RNA病毒,其刺突蛋白S为其最重要的结构蛋白,参与病毒与细胞受体的结合以及入侵宿主细胞的膜融合过程,决定着病毒的组织嗜性和毒力.目前对SARS-CoV基因组中与毒力相关的位点大多为生物信息学预测,确切的毒力位点尚未得到实验验证.本研究首先运用生物信息学方法对BJ01株S蛋白的可能毒力相关位点进行了分析预测,通过对病毒亚克隆进行体外突变,构建了突变病毒全长cDNA;然后观察比较突变病毒的感染性与原型病毒的差异.结果显示,S蛋白上的受体结合位点(E452和D454)的突变明显降低了BJ01株病毒对Vero E6细胞的感染性,突变病毒的空斑滴度为2×102 PFU/ml,其感染性与原型株相比降低了3个数量级.本研究表明,SARS-CoVBJ01株S蛋白的受体结合位点与病毒的毒力及致病性密切相关,针对该部位的突变可显著影响病毒的感染性,这一结果为深入探索SARS-CoV的致病机制及设计抗病毒策略提供了理论依据.
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