【摘 要】
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黑色素皮质素受体1(Melanocortin Receptor l,MC1R)是参与不同种属哺乳动物毛色调控的最主要基因之一[1],其存在于黑素细胞表面,调控黑色素的合成.MC1R 作为G 蛋白偶联受体主要通过异源三聚体G 蛋白的激活完成.Gαs作为异源三聚体G 蛋白的下游亚基基因在不同毛色绵羊背部皮肤中表达不同,它通过黑皮质素信号通路调节单个黑色素细胞生成色素类型,因此,Gαs基因可能在毛色形成
【机 构】
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山西农业大学动物科技学院,太谷,030801
【出 处】
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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议
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黑色素皮质素受体1(Melanocortin Receptor l,MC1R)是参与不同种属哺乳动物毛色调控的最主要基因之一[1],其存在于黑素细胞表面,调控黑色素的合成.MC1R 作为G 蛋白偶联受体主要通过异源三聚体G 蛋白的激活完成.Gαs作为异源三聚体G 蛋白的下游亚基基因在不同毛色绵羊背部皮肤中表达不同,它通过黑皮质素信号通路调节单个黑色素细胞生成色素类型,因此,Gαs基因可能在毛色形成中具有重要作用.本试验通过设计引物扩增绵羊Gαs目的基因序列,从基因水平和蛋白水平进行定量分析,并对其在不同毛色皮肤组织中进行定位分析,以研究其表达的差异,从而为进一步研究该基因调控绵羊毛色的形成机制提供基本的理论依据.试验结果如下：1.依据(NCBI)GeneBank 中所公布的绵羊Gαs序列,以该序列的保守区为基础,按照引物设计原则设计引物并合成,通过反转录PCR(RT-PCR)技术成功扩增出Gαs目的基因的部分序列,测序所得长度为139bp.通过荧光定量PCR(QRT-PCR)技术研究Gαs目的基因在绵羊耳部不同毛色皮肤组织中mRNA 的相对表达量,以探寻其与毛色之间的关系.结果显示：绵羊耳部黑色皮肤中Gαs mRNA 的相对表达量为：2.7185±0.3565；绵羊耳部白色皮肤中Gαs mRNA 的相对表达量为：1.2542±0.1132,黑色皮肤表达量显著高于白色皮肤表达量(P＜0.05).表明该基因与毛色有一定的相关性.2.通过免疫组织化学法对Gαs在绵羊耳部皮肤组织中的表达进行定位研究,结果显示Gαs在绵羊耳部毛发的毛乳头和外根鞘部呈阳性表达.3.应用免疫印迹法(Western blot)对Gαs蛋白在绵羊耳部不同毛色皮肤组织中的表达量进行研究,结果显示：Gαs蛋白在绵羊耳部黑色和白色皮肤中均有表达,并且在黑色皮肤中的表达量显著高于白色皮肤.综上研究得出：Gαs在绵羊耳部黑色皮肤和白色皮肤中均有表达且存在差异性,初步判断Gαs参与绵羊耳部毛色的调控过程.
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