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慢病毒介导shRNA转染干扰PHD2基因,上调HIF-1 α抑制兔髓核细胞退变

来源 :2016年浙江省骨科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ghostframe
【摘 要】
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目的 研究携带shRNA慢病毒转染原代髓核细胞,干扰PHD2基因表达,上调HIF-1α蛋白表达对髓核细胞退变的抑制作用.方法：1、根据兔髓核细胞PHD2基因预测序列,设计4条shRNA干扰序列,shRNA1-4,慢病毒包装后转染髓核细胞,检测干扰效率,并选择实验组shRNA.2、将实验组携带shRNA慢病毒和对照组空载慢病毒分别转染兔原代髓核细胞,根据自然传代培养退变模型获取P0-P3代髓核细胞.
【作 者】
：
陈琪 杨曦 刘立岷 宋跃明 
【机 构】
：
四川大学华西医院;浙江省人民医院 四川大学华西医院
【出 处】
：
2016年浙江省骨科学学术年会
【发表日期】
：
2016年11期
【关键词】
：
shRNA干扰序列 PHD2基因 HIF-1α Aggrecan Col Ⅱ MMP-2 
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　　目的 研究携带shRNA慢病毒转染原代髓核细胞,干扰PHD2基因表达,上调HIF-1α蛋白表达对髓核细胞退变的抑制作用.方法：1、根据兔髓核细胞PHD2基因预测序列,设计4条shRNA干扰序列,shRNA1-4,慢病毒包装后转染髓核细胞,检测干扰效率,并选择实验组shRNA.2、将实验组携带shRNA慢病毒和对照组空载慢病毒分别转染兔原代髓核细胞,根据自然传代培养退变模型获取P0-P3代髓核细胞.实验组P0-P3代髓核细胞qPCR检测PHD2和HIF-1α基因表达水平；实验组、对照组P0-P3代髓核细胞检测细胞凋亡率；Western blot检测实验组和对照组P0-P3代髓核细胞HIF-1α、MMP-2、Aggrecan、Col Ⅱ蛋白表达水平.
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